|
راه اندازى روش نوین ملکولى PCR
براى تشخیص زود هنگام و قطعى مایکوپلاسما گالى سپتیکوم و سنیویه براى اولین بار در کشور عفونت مایکوپلاسما در سطح جهان به علت بروز خسارات اقتصادى قابل توجه در فارم هاى پرورشى اجداد مادر و گوشتى مرغ و بوقلمون از اهمیت بالایى برخوردار است .
مراکز بین المللى کنترل بیماریهاى طیور تلاش فراوانى در جهت ریشه کنى عفونت مایکوپلاسما در فارم هاى اجداد و مادر نموده اند ولى در بسیار از کشورها از جمله ایران همچنان مایکو مایکوپلاسموزیس و زیان هاى ناشى از آن به عنوان یک معضل جدى باقى مانده است از بین گونه هاى مختلف مایکوپلاسما چهار گونه مایکوپلاسما گالى سپتکیوم (عامل عفونت مزمن تنفسى CRD در جوجه هاى مرغ و نیز سینوزیت مزمن در بین بوقلمون ها) مایکوپلاسما سینوویه (عامل عفونت ساب کلینیکیال دستگاه فوقانى و تنفسى و نیز عامل ایجاد سینوزیت در جوجه هاى مرغ بوقلمون) مایکوپلاسما هله آگریدس (عامل بروز لزیون هاى اولیه در کیسه هاى هوایى تخم هاى جنین دار بوقلمون که نهایتا باعث کاهش جوجه آورى و همچنین ضعف عمومى جوجه ها مى شود) از دیگر گونه ها از لحاظ اقتصادى در ایجاد ضرر و زیان در فارم هاى پرورش طیور صنعتى مهم تر مى باشد از آنجا که وقوع عفونت همزمان گونه هاى مختلف مایکوپلاسما در یک میزبان وجود دارد لذا مجموعه اى از علائم کلینیکى گله ها قبلا قابل مشاهده است .
دستیابى به تشخیص سریع ، دقیق قطعى مایکوپلاسما با توجه به اهمیت اقتصادى آن براى مسوولین بهداشتى و دامپزشکان فارم هاى مادر و اجداد اهمیت فراوانى دارد زیرا تشخیص زود هنگام و قطعى مى تواند مدیریت بهداشتى فارم را در حفظ سلامت عمومى گله جلوگیرى از پیشرفت بیمارى و انتخاب سیاست هاى درمانى مناسب یارى نماید .
در حال حاضر دو روش سرولوژى را پیدآگلوتیناسیون والایزا براى بررسى مایکوپلاسما در طیور صنعتى مورد استفاده مى شود . از آنجا که تست هاى سرولوژى به علت پدیده تداخل متقابل با گونه هاى دیگر مایکوپلاسما و همچنین حضور فاکتورهاى غیر اختصاصى متغیر در سرم ، حساسیت و اختصاصیت کافى در تشخیص سویرهاى مایکوپلاسما را ندارند و بعضا باعث بروز جواب هاى مثبت کاذب مى شوند لذا جداسازى و کشت مایکوپلاسما على رغم زمان بر بودن و سخت رشد بودن مایکوپلاسما در محیط آزمایشگاهى به عنوان روش قطعى تایید نهایى مایکوپلاسماى طیور مورد استفاده قرار مى گرفت . در چند سال اخیر با ابداع روش مولکولى PCR این تکنیک به عنوان اصلى ترین روش در تشخیص قطعى مایکوپلاسما مورد استقبال مدیران بهداشتى فارم هاى صنعتى قرار گرفته است روش PCR از تکنولوژى مهندسى ملکولى بهره گرفته که از نظر اصول علمى مشابه با همانند سازى DNA در داخل سلول مى باشد به طورى که قطعه خاصى از DNA به طور آنزیماتیک همانند سازى مى گردد تا میزانى که بتوان محصول را با روش هایى همچون الکتروفورزد در ژل آشکار نمود در این روش مى توان ژن ویرولان عامل پاتوژن را براى تکثیر انتخاب نمود و در نتیجه با یک آزمایش سویر پاتوژن یا آپاتوژن را نیز مى توان تشخیص تفریقى دار براى دستیابى به جواب قطعى وجود عفونت مایکوپلاسما در طیور فقط حضور چند کپى از ژن مورد نظر کافى است تا به وسیله سوآپ از ناى برداشته شود و در اثر تکثیر متوالى نتیجه قطعى حاصل گردد از طرف دیگر از آزمایش PCR نتیجه مثبت مایکوپلاسموزیس در همان روز اول عفونت حاصل مى شود که در مقایسه با روش هاى سرولوژى حداقل 2 تا 3 هفته زودتر مى توان به نتیجه قطعى دست یافت . از آنجا که تشخیص همزمان چند سویه مایکوپلاسما در طیور بسیار حایز اهمیت است لذا در روش هاى جدید PCR به نام Multiplex PCR گونه هاى مختلف مایکوپلاسما به طور همزمان شناسایى مى گردند .
|